醫藥行業是關系國計民生的重要產業，在保障人民群眾身體健康和生命安全、應對重大公共衛生事件和搶險救災、促進經濟發展和社會進步等方面發揮了重要的作用。“十六大”以來，醫藥行業形成了化學原料藥、化學藥品制劑、中藥飲片、中成藥、生物與生化制品、衛生材料及醫藥用品、醫療儀器設備及器械制造加工等門類比較齊全的產業體系，在對生產安全控制極其嚴格。醫藥廠房可能由于維護管理不當或工作人員誤操作以及凈化空調系統長期使用運轉使空氣過濾器性能變化等各類因素, 會影響潔廠房的性能參數。為了保障生產安全，所以投入使用后的潔凈廠房空氣浮游菌的日常監測是十分必要的重要工作。

我們使用環凱牌浮游微生物采樣器（HKM-II）對潔凈廠房進行采樣，HKM--II 型浮游微生物采樣器是一種高效的多孔吸入式浮游微生物采樣器。它根據等速采樣理論設計，采樣準確。采集頭口風速與潔凈室內風速基本一致，能更準確地反映潔凈室內的微生物濃度。采集樣本時，空氣攜帶顆粒以一定的速達撞擊在培養基表面，這一過程相當于安德森原理的 5 級，保證大于 1 微米的顆粒全部被收集。顆粒均勻撞擊在培養皿內的培養基表面，培養基為細菌創造了保持活性的最佳環境，保證了測定結果精確可靠。采樣準備工作如下：

1）被測試潔凈室溫、濕度須達到規定的要求; 靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。

2）對單向流測試應在凈化空調系統正常運行不少于 10 min;非單向流不少于 30 min 后開始。

3）靜態測試時, 室內人員不多于 2 人。采樣時測試人員應在采樣口下風側。

4）測試人員應按無菌操作規程進行。采取一切措施防止采樣口的污染和其它人為對樣本的污染。

5）測試人員必須穿戴符合潔凈級別的潔凈服。

6）浮游菌測試前, 被測手術室(潔凈室)已經過消毒。

以上準備好時，我們使用HKM-II采樣器采樣步驟：

1、 在有平臺的潔凈室內編制培養皿 (XX 潔凈室, XX 測點), 操作前應用浸濕 75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭平臺。測試人員雙手用同樣方法嚴格消毒。在編制過程中再次仔細檢查培養基平皿的質量, 有變質、破損或污染不能使用。

2、用浸濕 75%乙醇的醫用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口, 采樣管、采樣器的項蓋, 轉盤及罩子內外表面。

3、 采樣器經消毒后不放入培養皿, 啟動儀器空轉運行不少于 5 min, 使儀器中的殘余消毒劑蒸發。

4、 根據廠房的潔凈度級別設定采樣量，采樣器的流量(L/min)X 采樣時間(min)=采樣量(L), 每次最小的采樣量見表 。

5 、放入培養皿,蓋上蓋子后調節采樣器縫隙高度。采樣操作時, 培養皿應輕拿輕放, 用“五指抓拿”培養皿外徑, 盡量避免人為對樣本造成污染。

7、采樣點的布置及采樣點數量

注意事項：測點的位置離地面 0.8 m~1.5 m 左右；送風口測點位置離開送風口面 0.3 m 左右，最少采樣點數目見表。

正式啟動HKM-II采樣器（見下圖）

按“菜單鍵”進入參數設定狀態：

a、 采樣量設定：按“選擇鍵”調整光標位置，按“上、下鍵”調整至所需采樣量，按“退出鍵”退出設定，按“菜單鍵”進入下一參數設定。

b、 采樣延遲時間設定：按“上、下鍵”調整至所需采樣延遲時間，按“退出鍵”退出設定，按“菜單鍵”進入下一參數設定。

c、 采樣地點設定：按“上、下鍵”設定采樣地點編碼，按“退出”鍵退出設定，按“菜單鍵”進入下一參數設定。

d、保存采樣設定： 按“上、下鍵”選擇“是”保存當前的采樣參數，并按“選擇鍵”生效。按“退出鍵”返回主菜單，設定完成。

e、再按“采樣鍵” ，浮游微生物采樣器即進入采樣工作狀態；此時采樣延遲倒計時將會啟動，采樣延遲倒計時結束后采樣泵自動開始運行，在到達設定的采樣量后，采樣泵將自動停止，屏幕返回主界面，本次采樣結束，相關采樣數據自動貯存。

8、 培養

8.1、把采樣好的培養皿收集倒置在已消毒過的平臺上。

8.2、用已高壓滅菌過的牛皮紙、包布包裝好裝入消毒盒送培養。

8.3、 雙手再經消毒后, 小心取出已采樣過的培養皿樣本, 倒置于 35℃恒溫培養箱培養 48 h。

9 、菌落計算

9.1、用肉眼直接讀數, 然后用 5~10 倍放大鏡檢查是否有遣漏。若平皿上有 2 個或 2 個以上菌落重疊、分辨時仍以 2 個或 2 個以上讀數。或用環凱牌全自動菌落計數儀smartcounter計數，方便直接得出結果。

9.2、填寫生物微粒檢測記錄、記錄表見。

10、 結果計算：每個測點的浮游菌濃度計算

平均濃度(個/m)=菌落數/采樣量

11、結果評定

用浮游菌平均濃度判斷潔凈室(區)空氣中的微生物。(見以下潔凈手術室的等級標準) 

注意：

1）每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選的評定標準中關于細菌濃度的界限。

2 )若某測點的浮游菌平均濃度超過評定標準, 則必須對此區域先行消毒, 然后重新采樣兩次。再次測試結果必須合格。